【摘 要】
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高原鼠兔(Ochotona curzoniae)对高原低氧环境有很强的适应性。本研究组前期研究显示,精子特异性乳酸脱氢酶(sperm-specific lactate dehydrogenase,LDH-C4)基因Ldh-c在高原
【基金项目】
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supported by the National Natural Science Foundation of China(No.31260512);the Natural Science Foundation of Qinghai Province,China(No.2012-Z-905)
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高原鼠兔(Ochotona curzoniae)对高原低氧环境有很强的适应性。本研究组前期研究显示,精子特异性乳酸脱氢酶(sperm-specific lactate dehydrogenase,LDH-C4)基因Ldh-c在高原鼠兔心、肝、脑、肌肉等组织中都有表达。本研究为了阐明LDH-C4对高原鼠兔心肌组织无氧糖酵解水平的影响,将20只高原鼠兔随机分为抑制剂组和空白对照组,每组10只。抑制剂组注射1 m L 1 mol/L LDH-C4特异性抑制剂N-isopropyl oxamate于高原鼠兔股二头肌,双侧各注射500μL;空白对照组注射等量的生理盐水。应用荧光定量PCR和Western blot方法,测定LDH-C4基因Ldh-c在高原鼠兔心肌组织中的m RNA和蛋白表达水平;比较抑制剂组和空白对照组高原鼠兔心肌组织中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力;以及乳酸(lactate,LD)和ATP含量。结果显示,在m RNA和蛋白水平,Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中均有表达,相对表达量分别为0.47±0.06和0.68±0.08;当肌肉注射1 m L 1 mol/L的N-isopropyl oxamate时,30 min后血液中抑制剂浓度为0.08 mmol/L,与空白对照组相比,抑制剂组心肌组织中LDH活力[(6.18±0.48)U/mg vs(9.08±0.58)U/mg]、LD[(0.21±0.03)mmol/g vs(0.26±0.04)mmol/g]和ATP含量[(4.40±0.69)nmol/mg vs(6.18±0.73)nmol/mg]显著下降(P<0.01)。N-isopropyl oxamate对LDH活力、LD和ATP含量的抑制率分别为31.98%、20.90%和28.70%。以上结果说明:Ldh-c基因在高原鼠兔心肌组织中表达;LDH-C4通过催化无氧糖酵解过程,为心肌组织的活动提供至少28%的ATP,这可能降低高原鼠兔在低氧环境中对氧气的依赖,增强其对低氧环境的适应。
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