研究双嵌合抗原受体T细胞(BiCAR-T细胞)对人急性髓系白血病细胞株HL60的体外细胞毒活性，以及其对NOD SCID小鼠急性髓系白血病模型的体内抗肿瘤作用。
方法制备BiCAR-T细胞，用流式细胞仪检测嵌合抗原受体(CAR)的表达情况。体外实验分为实验组(BiCAR-T细胞)和对照组(T淋巴细胞)，设立不同的效靶比(5∶1、10∶1、20∶1)，用CCK8法测定BiCAR-T细胞体外对HL60细胞的杀伤率，用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测BiCAR-T细胞与HL60细胞共培养48 h后培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)水平。用HL60细胞尾静脉注射NOD SCID小鼠建立急性髓系白血病模型观察BiCAR-T细胞体内抑瘤作用，按随机数字表法将NOD SCID小鼠随机分为空白对照组、模型组和治疗组，每组10只。空白对照组通过尾静脉注射0.9% NaCl，模型组和治疗组通过尾静脉注射1×107个HL60细胞造模，造模20 d后治疗组经尾静脉注射2×107个BiCAR-T细胞，空白对照组和模型组经尾静脉注射0.9% NaCl，每周注射3次，共2周，注射体积均为0.2 ml。治疗2周后取小鼠脏器进行病理学检测。
结果流式细胞术检测结果表明BiCAR-T细胞CAR的表达率>50.00%。效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时，实验组BiCAR-T细胞和对照组T淋巴细胞的杀伤率分别为(25.43±1.32)%∶(16.18±0.75)%、(50.33±3.11)% ∶(25.47±1.27)%和(85.89±3.96)% ∶(49.45±2.77)%，其中BiCAR-T细胞和T淋巴细胞对HL60细胞杀伤率的主效应比较，差异有统计学意义(F＝404.17，P<0.001)；不同效靶比时BiCAR-T细胞和T淋巴细胞对HL60细胞杀伤率比较，差异有统计学意义(F＝548.09，P<0.001)；不同效靶比时BiCAR-T细胞对HL60细胞的杀伤效率均显著优于T淋巴细胞(F＝45.36，P<0.001)。实验组BiCAR-T细胞和对照组T淋巴细胞与HL60细胞共培养48 h后培养上清液中IFN-γ水平分别为(435.65±20.44)pg/ml∶(356.75±19.87)pg/ml、(1 639.98±95.75)pg/ml∶(1 109.37±80.98)pg/ml和(3 467.43±187.54)pg/ml∶(2 245.52±112.66)pg/ml，其中实验组和对照组IFN-γ水平的主效应比较，差异有统计学意义(F＝156.24，P<0.001)；不同效靶比时IFN-γ水平比较，差异有统计学意义(F＝857.67，P<0.001)；不同效靶比时实验组的IFN-γ水平均显著高于对照组(F＝46.31，P<0.001)。对小鼠肝、脾组织进行苏木精-伊红(HE)染色，结果显示治疗组的白血病细胞浸润程度显著低于模型组。
结论BiCAR-T细胞是一种经基因工程修饰的高效靶向的免疫细胞，能于体内外强效抑制急性髓系白血病细胞的浸润。