【摘 要】
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目的：制备人胎盘酸性铁蛋白（PAF）,构建、表达并鉴定抗人PAF单链可变区抗体片段（scFv）.方法：设计以SfiⅠ、NotⅠ为酶切位点、以（Gly4Ser）3为linker的2对引物,从抗人PAF单克隆抗体可变
【机 构】
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华中科技大学同济医学院免疫药理研究室
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目的：制备人胎盘酸性铁蛋白（PAF）,构建、表达并鉴定抗人PAF单链可变区抗体片段（scFv）.方法：设计以SfiⅠ、NotⅠ为酶切位点、以（Gly4Ser）3为linker的2对引物,从抗人PAF单克隆抗体可变区基因的克隆载体中扩增VH和VL基因,用重叠延伸PCR在VH和VL基因间引入连接短肽,构建VH-linker-VL的scFv基因.经Sf Ⅰ、NotⅠ酶切后克隆到原核分泌型表达载体pUC19/119上,转化大肠杆菌TG1和筛选后测序验证,IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量（Mr）
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