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目的探讨一次性真空采血内负压不足的护理对策。方法将2009年8月—2010年7月发生真空采血管内负压不足情况作为对照组，采用一次性注射器接采血针头抽取不足血量的补救方法，补充缺少的标本血量；以2010年8月—2011年7月发生真空采血管内负压不足的情况作为观察组，采用一次性注射器抽取真空管内相应空气量的方法，补足缺少的负压。结果2种方法均能使标本血量达标，比较两组标本质量合格率，差异有统计学意义（p ＜0.05），采用一次性注射器抽取真空管内相应空气量的方法合格率为92%；采用一次性注射器接采血针头合格率为85%。采用一次性注射器抽取真空管内空气的方法合格率高。结论真空管内负压不足时，抽取真空管内相应空气量的方法可以提高标本合格率，保持采血系统密闭性，防止标本医源性污染，减少资源浪费，提高患者满意度。