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摘要： 通过出菇栽培试验，比较分析杏鲍菇菌株日引1号、杏3号与其组织分离菌株出菇性状、平均单袋产量、单袋利润情况等。试验结果，分离菌株与出发菌株现蕾时间及外观品质差异不大，而满袋时间分离菌株少于出发菌株 1～2 d。分离菌株日引1号-1、日引1号-3比出发菌株日引1号产量分别提高6 62%、0 6%，利润分别提高3309%、2 19%。日引1号-2产量与利润比出发菌株日引1号降低0 71%、4 17%。杏3号-1、杏3号-2比出发菌株杏3号产量分别提高1 99%、6 68%，利润分别提高42 08%、112 82%。结果表明，应用组织分离不仅可以保持出发菌株的优良特性，还可以达到较好的复壮效果，但分离时要注意子实体单株的选择。
关键词： 杏鲍菇；组织分离；工厂化；栽培试验
中图分类号： S646 1 40 4 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2015）08-0239-02
杏鲍菇（Pleurotus eryngii），别称刺芹菇、刺芹侧耳 [1]，是近年来开发栽培成功的集食用、药用、食疗于一体的珍稀食用菌新品种，深受消费者喜爱 [2]。目前，杏鲍菇工厂化栽培品种单一，菇农不断地对原有菌株进行多代转接，易出现杏鲍菇菌种退化现象，导致杏鲍菇产量、质量不稳定；另外受市场的影响，经济效益逐年下降，不少菇农陷入亏损，严重打击菇农栽培杏鲍菇的积极性，影响杏鲍菇产业的持续稳定发展。为此，我们对工厂化栽培的杏鲍菇菌株进行组织分离，通过品种对比试验，分析比较分离菌株与出发菌株的差异，寻找保持原有菌株优良特性的方法。
1 材料与方法
1 1 供试菌株
供试菌株7个，日引1号及其3株分离菌株，分别为日引1号-1、日引1号-2、日引1号-3；杏3号及其2株分离菌株，分别为杏3号-1、杏3号-2。日引1号是由福建省漳州市农业科学研究所选育，并于2010年通过福建省新品种认定的优良品种，杏3号为福建省漳州市农业科学研究所保存的菌株。
1 2 培养基配方
1 2 1 母种 马铃薯200 g、磷酸氢二钾1 g、硫酸镁1 g、糖20 g、琼脂20 g、水1 L。
1 2 2 原种、栽培种 原种采用麦粒作培养基，将无霉变的麦粒洗干净，用1%的石灰水浸泡24 h，洗净晾干，加1 5%的石灰和15%的木屑，搅拌均匀，装瓶高压灭菌，121 ℃灭菌 25 h，冷却接种；3级种采用枝条和麦粒作培养基，枝条和麦粒的处理与原种相同，含水量约62% [3]。
1 2 3 栽培袋 干料500 g、配方为玉米芯42%、木屑20%、麸皮20%、玉米粉8%、豆粕7%、石灰1 5%、碳酸钙1 5%。含水量约64%。
1 3 试验方法
1 3 1 试验设计 试验在山东福禾菌业科技有限公司进行。试验以菌株为因素，设置7个处理，采用完全随机区组设计，重复4次，每处理栽培袋数为240袋，试验总栽培袋数为 1 680 袋。
1 3 2 栽培管理 栽培管理参照工厂化栽培普遍使用的方法。培养料充分搅拌均匀，机械装料，装满料压紧后套上塑料环，塞上棉花塞，高压121 ℃持续灭菌2 5 h，冷却至30 ℃以下统一接种，接种后置24 ℃培养室避光统一培养，定期观察菌丝生长情况，发现污染及时清理。待菌丝满袋后，后熟7 d，移至出菇房出菇，温度13～16 ℃，空气湿度保持在60%～90% [4]，适当通风，给适当散射光，当菇蕾长至3～4 cm时统一疏蕾，待子实体成熟后采收，分别统计各处理的产量。
1 4 测定项目与统计方法
1 4 1 测定项目 （1）生物学效率： 记录子实体单袋产量，计算生物学效率；生物学效率=子实体鲜质量（g）/培养料干质量（g）×100%。（2）经济效益分： 按照当年原料价格及鲜菇市场价，计算不同杏鲍菇菌株的单袋销售额及利润，并进行经济效益分析。（3）观察各菌株的农艺性状，统计各菌株的总产量、单袋利润，并进行方差分析。
1 4 2 统计方法 采用DPS V2进行数据处理和统计显著性分析，采用LSD进行差异性分析 [5]。
2 结果与分析
2 1 不同菌株农艺性状
不同菌株出菇性状见表1。观察满袋时间、现蕾天数，结果组织分离菌株的满袋时间比出发菌株少，日引1号29 d满袋，而3株分离菌株在27、28 d均满袋。杏3号 31 d满袋，而2株分离菌株29、30 d满袋。现蕾时间出发菌株与分离菌株差异不大，一般在进出菇房后8、9 d。2株出发菌株的子实体外观品质差异较大，性状表现较好的为日引1号，整齐度较好，匀整质优，子实体色泽白嫩，大菇多，质地紧实，杏3号整齐度一般，色泽白偏黄，但质地紧实，分离菌株与出发菌株比较，外观品质基本没差异。
2 2 不同菌株产量
7个菌株的小菇蕾、商品等级菇、菇头平均质量及平均总产量、生物学效率差异较大。 出发菌株日引1号，产量 41892 g/袋，高于杏3号 378 71 g/袋，差异达极显著。日引1号的3株分离菌株产量均高于杏3号的2株分离菌株。供试菌株总产量按从高到低排序为日引1号-1﹥日引1号-3﹥ 日引1号﹥日引1号-2﹥杏3号-2﹥杏3号-1﹥杏3号。日引1号-1、日引1号-3总产量分别比出发菌株日引1号提高662%、0 6%，分离菌株日引1号-2总产量比日引1号降低071%，表明同一品种选择不同的子实体单株，对产量影响很大。分离菌株杏3号-1、杏3号-2总产量分别比杏3号增加1 99%、6 68%（表2）。
对7个试验菌株的平均单袋总产量进行方差分析，结果见表3。不同菌株间产量存在较大差异。结果表明，平均单袋总产量最高的是菌株日引1号-1，与其他菌株的总产量差异显著，与分离菌株日引1号-2存在极显著差异；日引1号-3与出发菌株日引1号总产量差异不显著；日引1号-2产量低于出发菌株日引1号，但二者差异不显著；分离菌株杏3号-2单袋总产量与出发菌株杏3号差异显著，与分离菌株杏3号-1差异不显著；杏3号-1与杏3号差异不显著。 2 3 不同菌株栽培利润比较
由于试验菌株各个等级菇市场售价一样，7个试验菌株的单袋销售额从高到低的排序与单袋总产量一致，方差分析结果也一致。单袋销售额最高的为日引1号-1，为1 99元/袋，单袋利润为0 39元/袋；最低的为杏3号，为170元/袋， 单袋利润为0 10元/袋。从表4可以看出，分离菌株杏3号-1、杏3号-2的单袋利润均高于出发菌株杏3号，分别提高42 08%、112 82%；分离菌株日引1号-1、日引1号-2单袋利润高于出发菌株日引1号，分别提高33 09%、219%，日引1号-3单袋利润低于日引1号4 17%。
3 结论与讨论
王波等指出，组织分离方法可以达到较好的提纯复壮效果 [6]，本试验结果也得到验证，分离菌株不仅较好地保持了出发菌株的优良特性，表现出菇整齐，朵形大，质地致密，菇体较白，平整，棍棒状，成品菇较多，菇蕾及成品菇比例占到了总产量的85%以上。分离菌株的产量、利润甚至优于出发菌株。本试验中出发菌株杏3号的2个分离菌株单袋产量及利润均高于出发菌株，日引1号其中2个分离菌株高于出发菌株。可能由于组织分离是通过筛选表现优良的个体，再结合人工连续的定向选择，使得现有品种的优良性状得以保持 [7]。
研究结果同一菌株的不同组织分离物，单袋产量、单袋利润差别较大，日引1号的3个分离菌株，其中日引1号-1、日引1号-3均高于出发菌株，而日引1号-2则低于日引1号，表明杏鲍菇进行组织分离时选择的子实体单株有差异，造成了组织分离菌株差异，因此要注意选择性状优良的单株，并在分离后对新获得的菌株进行出菇试验，确认为优良高产菌株后，才能应用于生产。
本试验中，出发菌株日引1号产量显著高于杏3号，日引1号的3株分离菌株产量均高于杏3号的2株分离菌株。说明分离菌株高产高效的特性很大程度取决于原来出发菌株，所以进行组织分离时特别要注意选择优良杏鲍菇品种，也说明组织分离对于创造新菌株具有一定的局限性。主要是组织分离是无性繁殖过程， 双亲的染色体没有经过重组。为了丰
富现有杏鲍菇品种，创造出更优更好的新菌株，还需要在组织分离基础上选择其他育种方法。相关报道食用菌不同时期、不同部位的子实体组织分离的栽培效果差异较大 [8-11]，对组织分离时期、部位还需开展进一步研究。
[HS2 2/3][HT8 5H]参考文献：
[1] 黄年来 一种市场前景看好的珍稀食用菌——杏鲍菇[J] 中国食用菌，1998，17（6）：4-5
[2]高小朋，贺晓龙，任桂梅，等 杏鲍菇组织分离母种及培养基筛选[J] 南方农业学报，2011，42（7）：705-707
[3]李为民，李 军，刘 杰，等 杏鲍菇菌株栽培比较试验[J] 农业科技通讯，2014（3）：58-59
[4]郭美英 杏鲍菇栽培技术[J] 食用菌，2006，28（5）：66-68
[5]张国慧，张改生，葛锋辉，等 小麦多子房性状外显率影响因子的初步研究[J] 植物遗传资源学报，2008，9（4）：528-530
[6]王 波，鲜 灵，唐利民，等 黄背木耳组织分离菌株比较试验[J] 中国食用菌，2001，20（3）：8-9
[7]王卓仁 组织分离法在食用菌选择育种中的原则与实践[J] 中国食用菌，2008，27（4）：12-13，44
[8]贺晓龙，刘 琳，任桂梅，等 白玉菇组织分离母种最佳部位探索[J] 江苏农业科学，2012，40（12）：251-252
[9]方白玉，方晓霞 杏鲍菇母种培养基优化及组织分离母种比较试验[J] 食用菌，2011（4）：29-30
[10] 陈丽新，黄卓忠 毛木耳子实体不同部位组织分离试验研究[J] 广西农业科学，2008，39（6）：808-810
[11]刘进杰，王淑芳，卜庆梅，等 四种食用菌子实体不同部位组织分离菌丝长势对比[J] 烟台职业学院学报，2006（2）：62-65
关键词： 杏鲍菇；组织分离；工厂化；栽培试验
中图分类号： S646 1 40 4 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2015）08-0239-02
杏鲍菇（Pleurotus eryngii），别称刺芹菇、刺芹侧耳 [1]，是近年来开发栽培成功的集食用、药用、食疗于一体的珍稀食用菌新品种，深受消费者喜爱 [2]。目前，杏鲍菇工厂化栽培品种单一，菇农不断地对原有菌株进行多代转接，易出现杏鲍菇菌种退化现象，导致杏鲍菇产量、质量不稳定；另外受市场的影响，经济效益逐年下降，不少菇农陷入亏损，严重打击菇农栽培杏鲍菇的积极性，影响杏鲍菇产业的持续稳定发展。为此，我们对工厂化栽培的杏鲍菇菌株进行组织分离，通过品种对比试验，分析比较分离菌株与出发菌株的差异，寻找保持原有菌株优良特性的方法。
1 材料与方法
1 1 供试菌株
供试菌株7个，日引1号及其3株分离菌株，分别为日引1号-1、日引1号-2、日引1号-3；杏3号及其2株分离菌株，分别为杏3号-1、杏3号-2。日引1号是由福建省漳州市农业科学研究所选育，并于2010年通过福建省新品种认定的优良品种，杏3号为福建省漳州市农业科学研究所保存的菌株。
1 2 培养基配方
1 2 1 母种 马铃薯200 g、磷酸氢二钾1 g、硫酸镁1 g、糖20 g、琼脂20 g、水1 L。
1 2 2 原种、栽培种 原种采用麦粒作培养基，将无霉变的麦粒洗干净，用1%的石灰水浸泡24 h，洗净晾干，加1 5%的石灰和15%的木屑，搅拌均匀，装瓶高压灭菌，121 ℃灭菌 25 h，冷却接种；3级种采用枝条和麦粒作培养基，枝条和麦粒的处理与原种相同，含水量约62% [3]。
1 2 3 栽培袋 干料500 g、配方为玉米芯42%、木屑20%、麸皮20%、玉米粉8%、豆粕7%、石灰1 5%、碳酸钙1 5%。含水量约64%。
1 3 试验方法
1 3 1 试验设计 试验在山东福禾菌业科技有限公司进行。试验以菌株为因素，设置7个处理，采用完全随机区组设计，重复4次，每处理栽培袋数为240袋，试验总栽培袋数为 1 680 袋。
1 3 2 栽培管理 栽培管理参照工厂化栽培普遍使用的方法。培养料充分搅拌均匀，机械装料，装满料压紧后套上塑料环，塞上棉花塞，高压121 ℃持续灭菌2 5 h，冷却至30 ℃以下统一接种，接种后置24 ℃培养室避光统一培养，定期观察菌丝生长情况，发现污染及时清理。待菌丝满袋后，后熟7 d，移至出菇房出菇，温度13～16 ℃，空气湿度保持在60%～90% [4]，适当通风，给适当散射光，当菇蕾长至3～4 cm时统一疏蕾，待子实体成熟后采收，分别统计各处理的产量。
1 4 测定项目与统计方法
1 4 1 测定项目 （1）生物学效率： 记录子实体单袋产量，计算生物学效率；生物学效率=子实体鲜质量（g）/培养料干质量（g）×100%。（2）经济效益分： 按照当年原料价格及鲜菇市场价，计算不同杏鲍菇菌株的单袋销售额及利润，并进行经济效益分析。（3）观察各菌株的农艺性状，统计各菌株的总产量、单袋利润，并进行方差分析。
1 4 2 统计方法 采用DPS V2进行数据处理和统计显著性分析，采用LSD进行差异性分析 [5]。
2 结果与分析
2 1 不同菌株农艺性状
不同菌株出菇性状见表1。观察满袋时间、现蕾天数，结果组织分离菌株的满袋时间比出发菌株少，日引1号29 d满袋，而3株分离菌株在27、28 d均满袋。杏3号 31 d满袋，而2株分离菌株29、30 d满袋。现蕾时间出发菌株与分离菌株差异不大，一般在进出菇房后8、9 d。2株出发菌株的子实体外观品质差异较大，性状表现较好的为日引1号，整齐度较好，匀整质优，子实体色泽白嫩，大菇多，质地紧实，杏3号整齐度一般，色泽白偏黄，但质地紧实，分离菌株与出发菌株比较，外观品质基本没差异。
2 2 不同菌株产量
7个菌株的小菇蕾、商品等级菇、菇头平均质量及平均总产量、生物学效率差异较大。 出发菌株日引1号，产量 41892 g/袋，高于杏3号 378 71 g/袋，差异达极显著。日引1号的3株分离菌株产量均高于杏3号的2株分离菌株。供试菌株总产量按从高到低排序为日引1号-1﹥日引1号-3﹥ 日引1号﹥日引1号-2﹥杏3号-2﹥杏3号-1﹥杏3号。日引1号-1、日引1号-3总产量分别比出发菌株日引1号提高662%、0 6%，分离菌株日引1号-2总产量比日引1号降低071%，表明同一品种选择不同的子实体单株，对产量影响很大。分离菌株杏3号-1、杏3号-2总产量分别比杏3号增加1 99%、6 68%（表2）。
对7个试验菌株的平均单袋总产量进行方差分析，结果见表3。不同菌株间产量存在较大差异。结果表明，平均单袋总产量最高的是菌株日引1号-1，与其他菌株的总产量差异显著，与分离菌株日引1号-2存在极显著差异；日引1号-3与出发菌株日引1号总产量差异不显著；日引1号-2产量低于出发菌株日引1号，但二者差异不显著；分离菌株杏3号-2单袋总产量与出发菌株杏3号差异显著，与分离菌株杏3号-1差异不显著；杏3号-1与杏3号差异不显著。 2 3 不同菌株栽培利润比较
由于试验菌株各个等级菇市场售价一样，7个试验菌株的单袋销售额从高到低的排序与单袋总产量一致，方差分析结果也一致。单袋销售额最高的为日引1号-1，为1 99元/袋，单袋利润为0 39元/袋；最低的为杏3号，为170元/袋， 单袋利润为0 10元/袋。从表4可以看出，分离菌株杏3号-1、杏3号-2的单袋利润均高于出发菌株杏3号，分别提高42 08%、112 82%；分离菌株日引1号-1、日引1号-2单袋利润高于出发菌株日引1号，分别提高33 09%、219%，日引1号-3单袋利润低于日引1号4 17%。
3 结论与讨论
王波等指出，组织分离方法可以达到较好的提纯复壮效果 [6]，本试验结果也得到验证，分离菌株不仅较好地保持了出发菌株的优良特性，表现出菇整齐，朵形大，质地致密，菇体较白，平整，棍棒状，成品菇较多，菇蕾及成品菇比例占到了总产量的85%以上。分离菌株的产量、利润甚至优于出发菌株。本试验中出发菌株杏3号的2个分离菌株单袋产量及利润均高于出发菌株，日引1号其中2个分离菌株高于出发菌株。可能由于组织分离是通过筛选表现优良的个体，再结合人工连续的定向选择，使得现有品种的优良性状得以保持 [7]。
研究结果同一菌株的不同组织分离物，单袋产量、单袋利润差别较大，日引1号的3个分离菌株，其中日引1号-1、日引1号-3均高于出发菌株，而日引1号-2则低于日引1号，表明杏鲍菇进行组织分离时选择的子实体单株有差异，造成了组织分离菌株差异，因此要注意选择性状优良的单株，并在分离后对新获得的菌株进行出菇试验，确认为优良高产菌株后，才能应用于生产。
本试验中，出发菌株日引1号产量显著高于杏3号，日引1号的3株分离菌株产量均高于杏3号的2株分离菌株。说明分离菌株高产高效的特性很大程度取决于原来出发菌株，所以进行组织分离时特别要注意选择优良杏鲍菇品种，也说明组织分离对于创造新菌株具有一定的局限性。主要是组织分离是无性繁殖过程， 双亲的染色体没有经过重组。为了丰
富现有杏鲍菇品种，创造出更优更好的新菌株，还需要在组织分离基础上选择其他育种方法。相关报道食用菌不同时期、不同部位的子实体组织分离的栽培效果差异较大 [8-11]，对组织分离时期、部位还需开展进一步研究。
[HS2 2/3][HT8 5H]参考文献：
[1] 黄年来 一种市场前景看好的珍稀食用菌——杏鲍菇[J] 中国食用菌，1998，17（6）：4-5
[2]高小朋，贺晓龙，任桂梅，等 杏鲍菇组织分离母种及培养基筛选[J] 南方农业学报，2011，42（7）：705-707
[3]李为民，李 军，刘 杰，等 杏鲍菇菌株栽培比较试验[J] 农业科技通讯，2014（3）：58-59
[4]郭美英 杏鲍菇栽培技术[J] 食用菌，2006，28（5）：66-68
[5]张国慧，张改生，葛锋辉，等 小麦多子房性状外显率影响因子的初步研究[J] 植物遗传资源学报，2008，9（4）：528-530
[6]王 波，鲜 灵，唐利民，等 黄背木耳组织分离菌株比较试验[J] 中国食用菌，2001，20（3）：8-9
[7]王卓仁 组织分离法在食用菌选择育种中的原则与实践[J] 中国食用菌，2008，27（4）：12-13，44
[8]贺晓龙，刘 琳，任桂梅，等 白玉菇组织分离母种最佳部位探索[J] 江苏农业科学，2012，40（12）：251-252
[9]方白玉，方晓霞 杏鲍菇母种培养基优化及组织分离母种比较试验[J] 食用菌，2011（4）：29-30
[10] 陈丽新，黄卓忠 毛木耳子实体不同部位组织分离试验研究[J] 广西农业科学，2008，39（6）：808-810
[11]刘进杰，王淑芳，卜庆梅，等 四种食用菌子实体不同部位组织分离菌丝长势对比[J] 烟台职业学院学报，2006（2）：62-65