目的 对磁珠法结合实时定量PCR（real-time quantitative PCR,qPCR）检测新型冠状病毒（简称新冠）灭活疫苗（Vero细胞）中宿主细胞残留DNA（residual cell DNA,rcDNA）进行验证及应用。方法 利用磁珠与溶液中DNA的特异性结合来提取样品中rcDNA。将已知浓度的细胞DNA标准品系列稀释后，根据DNA标准品的循环阈值与浓度之间的线性关系，对未知样品中的rcDNA进行定量分析。对方法进行线性和范围、专属性、准确度、精密度验证，并使用该方法对新冠灭活疫苗（Vero细胞）生产过程样品进行rcDNA及其片段大小检测。结果 标准品检测范围为0.000 3～30 pg/μL，该方法的标准曲线决定系数（R~2）> 0.99，扩增效率为90%～110%。质控样品回收率为50%～150%，相对标准偏差（RSD）均小于30%。试验结果的各项参数均符合标准。结论 磁珠法可解决rcDNA检测中样品前处理提取DNA的技术难点，qPCR能够简便、快速、准确地对新冠疫苗生产过程中的rcDNA进行定量测定。该方法适用于新冠疫苗中rcDNA的检测及疫苗生产过程和成品的质量控制，对其他采用同样细胞基质的病毒性疫苗质量控制也具有借鉴意义。