人甲状腺原代细胞的长期培养

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目的 探索人甲状腺细胞长期原代培养的方法及细胞在不同时期的功能变化。方法 常规分离甲状腺细胞,并用含有10%胎牛血清(FBS)、谷氨酰胺、牛胰岛素、10mU/LTSH和氢化可的松的MEM培养,细胞铺成单层后换用4% FBC的培养基培养,分别在不同时间观察甲状腺细胞吸碘率、细胞生长情况,免疫组化观察甲状腺特异抗原甲状腺球蛋白(Tg)表达水平,RT PCR测定钠碘转运子(NIS)基因表达水平。结果 甲状腺细胞在培养40d左右仍生长良好,培养14d细胞具有80%的吸碘率,培养7dTg表达可达95%,培养14dTg表达仍达60%,NISmRNA表达在培养7d达98%,而培养14d表达率只有40%。结论 应用该研究所建立的培养条件可以使甲状腺细胞生存40d以上,该实验条件下培养3, 7, 14,28d的原代甲状腺滤泡上皮细胞以培养7d的细胞NISmRNA,Tg表达、摄碘功能最接近基线水平。
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