乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达

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摘 要:目的:克隆编码人Ⅰ类乙醇脱氢酶基因,并探讨Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中的作用.方法:从胎儿肝,肾提取的总RNA;经RT-PCR扩增得到cDNA并克隆至pGEM-T载体.cDNA序列用Kpn Ⅰ和Pst Ⅰ酶切鉴定,并检测其在大肠杆菌中表达活性.通过吸光法检测酶的活性.结果:成功克隆了人Ⅰ类乙醇脱氢酶并在大肠杆菌中获得稳定表达.经检测其酶活性分别为0.81~1.31 U/mg、0.09~0.15 U/mg和0.76~1.11 U/mg.结论:cDNA克隆成功,并发现其与肝脏中分离的酶具有
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