【摘 要】
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目的 建立一种低浓度大体积样品中快速捕获富集大肠埃希菌O157∶H7的方法. 方法 利用链霉亲和素-生物素结合特性,将生物素标记大肠埃希菌O157∶H7特异性适配体与链霉亲和素磁
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130000;军事科学院军事兽医研究所动物性食品安全与生物交叉技术研究室;长春理工大学生命科学技术学院;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130000
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目的 建立一种低浓度大体积样品中快速捕获富集大肠埃希菌O157∶H7的方法. 方法 利用链霉亲和素-生物素结合特性,将生物素标记大肠埃希菌O157∶H7特异性适配体与链霉亲和素磁珠相结合,制备捕获磁珠,捕获样品中的大肠埃希菌O157∶H7,通过平板培养计数法检测捕获效率. 结果 通过优化反应条件,建立的适配体捕获磁珠富集法在O157∶ H7低浓度样品(103 cfu/ml)中捕获效率≥92.49％,大肠埃希菌O157∶H7浓度101 cfu/ml时捕获效率为96.08％,高浓度样品(107 cfu/ml)中捕获效率≥56.52％,在模拟实际样品(牛奶、果汁、汽水)中捕获效率均≥70％,与PCR法结果一致. 结论 基于免疫磁珠技术建立的大肠埃希菌快速捕获富集方法,具有特异性强、灵敏度高操作简单、成本低廉等特点,在实际检测中具有良好发展前景.
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