【摘 要】
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目的介绍一种大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的急性分离方法并观察电压门控性钾电流电生理特性。方法应用胶原酶和木瓜蛋白酶联合消化法获得大鼠PASMCs,利用全细胞膜片钳技术
【机 构】
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华中科技大学同济医学院基础医学院生理系,华中科技大学同济医学院基础医学院生理系,华中科技大学同济医学院基础医学院生理系,华中科技大学同济医学院基础医学院生理系,华中科技大学同济医学院基础医学院生理系,
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目的介绍一种大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的急性分离方法并观察电压门控性钾电流电生理特性。方法应用胶原酶和木瓜蛋白酶联合消化法获得大鼠PASMCs,利用全细胞膜片钳技术记录PASMCs膜上的电压门控性钾通道(Kv)电流。结果在相差显微镜下观察大鼠PASMCs呈舒展梭形,边界清晰,有完整的细胞膜,胞浆均匀,数量多,活性好。结论用酶急性分离的大鼠PASMCs,容易进行全细胞膜片钳记录,方法简单、稳定、可靠。
Objective To introduce an acute isolation method of rat pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) and observe the electrophysiological characteristics of voltage-gated potassium currents. Methods PASMCs were obtained by digestion with collagenase and papain. Whole-cell patch-clamp technique was used to record the voltage-gated potassium channels (Kv) currents in PASMCs. Results Under the phase contrast microscope, the rat PASMCs showed a fusiform shape with a clear boundary, a complete cell membrane, a uniform cytoplasm, a large number and good activity. Conclusion The acute isolation of rat PASMCs is easy to perform whole-cell patch-clamp recording. The method is simple, stable and reliable.
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