【摘 要】
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目的 探讨加味四逆散对慢性不可预计轻度应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠应激弹性的影响及其miR-124—海马神经发生作用机制.方法 根据糖水偏爱度将大鼠随机分成正常组(CON)、模型组(CUMS)、加味四逆散组(16.9 g·kg-1),每组20只.采用慢性不可预计轻度应激建立8周CUMS大鼠模型.采用糖水偏爱实验(SPT)、旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)观察大鼠的行为学变化;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马R
【机 构】
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广州中医药大学中西医结合基础研究中心,广东广州510006
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目的 探讨加味四逆散对慢性不可预计轻度应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠应激弹性的影响及其miR-124—海马神经发生作用机制.方法 根据糖水偏爱度将大鼠随机分成正常组(CON)、模型组(CUMS)、加味四逆散组(16.9 g·kg-1),每组20只.采用慢性不可预计轻度应激建立8周CUMS大鼠模型.采用糖水偏爱实验(SPT)、旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)观察大鼠的行为学变化;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马RE1-沉默转录抑制因子(RE1-silencing transcription repressor,REST)、羧基端小结构域磷酸酶1(Small C terminal domain phosphatase 1,SCP1)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测大鼠海马miR-124、REST mRNA及SCP1 mRNA的表达;采用免疫荧光标记实验检测大鼠海马DG区Brdu-DCX、NeuN的表达.结果 与CON组相比,CUMS组大鼠糖水偏爱度明显下降(P＜0.01),OFT自发活动显著降低(P＜0.01),FST不动时间显著延长(P＜0.05),海马DG区Brdu-DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少(P＜0.01,P＜0.01),海马REST、SCP1蛋白含量明显增加(P＜0.01,P＜0.05),海马miR-124含量显著减少(P＜0.05),REST mRNA、SCP1 mRNA含量显著增加(P＜0.01,P＜0.01).与CUMS组相比,加味四逆散可显著提高大鼠糖水偏爱度(P＜0.01)、增加OFT总路程(P＜0.01),缩短FST不动时间(P＜0.05);加味四逆散能明显提升组内应激弹性大鼠所占的比例;显著提升CUMS大鼠海马DG区Brdu-DCX、NeuN标记的阳性细胞数(P＜0.01;P ＜0.01);显著降低海马REST、SCP1蛋白含量(P＜0.05,P＜0.05);显著提升CUMS大鼠海马miR-124含量(P＜0.01)、降低REST mRNA含量、SCP1 mRNA含量(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05).结论 加味四逆散能明显改善CUMS大鼠行为学异常并显著提高应激弹性大鼠所占比例,其可能的机制是通过REST-SCP1环路调控miR-124含量进而促进海马神经发生.
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