【摘 要】
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描述了一种基于双倍PCR技术,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法.应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA.第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B,用于扩增大亚基核糖体基因(28S r
【机 构】
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中国农业科学院植物保护研究所,Institute of Parasitology of Russian Academy of Sciences,Agricultural Research Centre
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描述了一种基于双倍PCR技术,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法.应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA.第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B,用于扩增大亚基核糖体基因(28S rDNAgene)的D3扩展区;第二组引物包括大豆胞囊线虫种特异性引物GlyF1和一个通用引物rDNA2,用于扩增ITS2区的片断和部分28S基因.用此双倍PCR扩增技术检测了来自中国、俄罗斯、美国和巴西的53个大豆胞囊线虫群体,结果表明, 用两组引物进行双倍PCR扩增, 所有53个大豆胞囊线虫群体都产生两个明显的片断(181 bp and 345 bp),其中181bp片断是SCN特异性引物GlyF1和rDNA2扩增出大豆胞囊线虫中特异性片断.在所测试的其它胞囊线虫群体,仅仅扩增出345bp的片断,而不能扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断.用该项技术能从大豆胞囊线虫的单个胞囊或单头二龄幼虫的微量DNA中,扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断,该技术的敏感性达到单条二龄幼虫的水平.
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