【摘 要】
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目的 探讨DNA载体途径的RNA干扰技术抑制肿瘤细胞的作用及机理.方法构建针对人端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA干扰质粒PSG-AS及对照质粒PSG-CTR,并将其分别转染HCCLM3肝癌细胞.Western 印迹测定hTERT的表达量;末端重复片断扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定细胞端粒酶活性;流式细胞仪测定细胞凋亡率,MTS法测定细胞生长曲线以观察PSG-AS对细胞
【机 构】
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212013,镇江,江苏大学生命科学院,上海交通大学医学院肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海交通大学医学院肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海交通大学医学院肿瘤研究所癌基因及相关
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目的 探讨DNA载体途径的RNA干扰技术抑制肿瘤细胞的作用及机理.方法构建针对人端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA干扰质粒PSG-AS及对照质粒PSG-CTR,并将其分别转染HCCLM3肝癌细胞.Western 印迹测定hTERT的表达量;末端重复片断扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定细胞端粒酶活性;流式细胞仪测定细胞凋亡率,MTS法测定细胞生长曲线以观察PSG-AS对细胞的生长抑制作用.结果转染PSG-AS 的HCCLM3细胞 hTERT表达量减低,端粒酶活性抑制率为76%;PSG-AS转染细胞后凋亡率较PSG-CTR组明显升高(t=11.47,P<0.01),细胞生长受抑.结论 PSG-AS作用HCCLM3肝癌细胞后,通过对hTERT表达量和端粒酶活性的抑制,促进细胞凋亡和抑制细胞的增殖,此法可能成为抑制肿瘤细胞的新途径。
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