人Tnfrsf11b—N端多肽的原核表达、纯化及其初步分析

来源 :中国骨质疏松杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yzl1983523
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目的对原核表达和可溶性纯化后的Tnfrsf11b蛋白氨基端的24.106位肽段进行二级结构分析。方法根据已经发表的人Tnfrsf11b氨基酸序列,利用BLAST程序进行同源性分析,确定所要构建的Tnfrsf11bN端CRD功能结构域;将目的基因片段克隆入表达载体pGEX-6P-1并转化大肠杆菌BL21(DE3),于16℃、0.1mmol/LIPTG诱导25—30h可获得可溶性融合蛋白,经过Glutathione Sepharose^TM 4B亲和层析纯化和PreScission Protease酶切,洗脱
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