【摘 要】
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摘要：【目的】建立Toll樣受体3（TLR3）基因缺失的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系，为探索狂犬病毒感染机体过程中TLR3在固有免疫反应中的作用机制提供理论依据。【方法】采用Golden Gate Kit试剂盒组装转录激活样效应因子核酸酶（TALEN）打靶载体pTALEN-TLR3，经酶切和测序验证其连接正确后，通过脂质体瞬时转染RAW264.7细胞，转染后提取细胞DNA，用T7核酸内切酶酶
【机 构】
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亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西大学动物科学技术学院,广西动物疫病预防控制中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31570147）
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【目的】建立Toll样受体3（TLR3）基因缺失的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系,为探索狂犬病毒感染机体过程中TLR3在固有免疫反应中的作用机制提供理论依据。【方法】采用Golden Gate Kit试剂盒组装转录激活样效应因子核酸酶（TALEN）打靶载体p TALEN-TLR3,经酶切和测序验证其连接正确后,通过脂质体瞬时转染RAW264.7细胞,转染后提取细胞DNA,用T7核酸内切酶酶切验证TALEN质粒剪切活性。【结果】TALENs左右臂分两部分连接,首先完成A、B部分的各自连接,然后分别将T1
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