真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1的构建及其在胆管癌细胞的表达

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目的构建真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1,并在胆管癌细胞系QBC939中进行表达。方法采用RT-PCR法从人胆管组织中克隆KAI1基因,连接T载体并测序正确后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切鉴定后通过脂质体法转染QBC939细胞中,用荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,用免疫组化染色的方法检测细胞中KAI1的表达。结果成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP-KAI1,用脂质体法转染胆管癌细胞QBC939后,经荧光显微镜和免疫组化染
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