【摘 要】
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目的:探究HeLa细胞中敲除GW182基因后,对HeLa细胞增殖能力的影响。方法:应用CRISPR-CAS9技术设计sgRNA序列,然后通过慢病毒诱导GW182基因敲除,挑取单克隆,进行扩大培养,通过W
【机 构】
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武汉大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系;
【基金项目】
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中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室开放研究课题（编号：2017Kf07)
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目的:探究HeLa细胞中敲除GW182基因后,对HeLa细胞增殖能力的影响。方法:应用CRISPR-CAS9技术设计sgRNA序列,然后通过慢病毒诱导GW182基因敲除,挑取单克隆,进行扩大培养,通过Western Blot检测GW182敲除效率;取对数生长期的对照组和实验组的细胞,用Cell counting kit(CCK)检测细胞增殖,亚甲基蓝溶液检测细胞的克隆形成,用EdU试剂盒检测细胞增殖情况。结果:和对照组相比,GW182基因敲除后细胞生长明显受到抑制,并且有凋亡的趋向。结论:GW182蛋白的缺失导致RNA代谢紊乱,进而抑制细胞的增殖,在未来精准医疗中GW182有望作为抑制宫颈癌的新药物靶点。
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