【摘 要】
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目的 比较两种不同核酸提取方法在人乳头瘤病毒（HPV）亚型检测中的应用，为实验室选择相应的核酸提取方法来获得有效的HPV结果提供依据。方法 收集25例浸润性宫颈癌福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织标本，采用粗提法和纯化法两种核酸提取方法提取DNA标本，并通过检测DNA浓度、纯度及内参β-Globin来评估DNA质量。将提取的DNA经PCR扩增后，应用PCR-反向点杂交法检测HPV亚型，分析两种提
【机 构】
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四川大学华西第二医院病理科/出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室
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目的 比较两种不同核酸提取方法在人乳头瘤病毒（HPV）亚型检测中的应用，为实验室选择相应的核酸提取方法来获得有效的HPV结果提供依据。方法 收集25例浸润性宫颈癌福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织标本，采用粗提法和纯化法两种核酸提取方法提取DNA标本，并通过检测DNA浓度、纯度及内参β-Globin来评估DNA质量。将提取的DNA经PCR扩增后，应用PCR-反向点杂交法检测HPV亚型，分析两种提取方法HPV检测结果的有效性及一致性。结果 两种提取方法均能获得适量的DNA用于HPV检测，粗提法较纯化法可获得较高的DNA浓度（P＜0.05）,但存有一定有机物及蛋白质污染。纯化法较粗提法获得的DNA纯度更高（P＜0.05）。将粗提法和纯化法提取的DNA用于检测HPV感染，总HPV阳性率分别为92%和96%。采用粗提法提取的DNA标本高危型HPV（HR-HPV）阳性率低于纯化法（92%vs. 96%）,但单一型HPV16阳性率高于纯化法（44%vs. 36%）;与纯化法相比，粗提法提取的DNA无法检测出更多型别的混合感染，而FFPE组织标本经纯化法分离后可检测出HPV33、HPV53、HPV58等多型别感染。结论 采用粗提法和纯化法进行FFPE组织核酸提取，均可获得足量DNA用于HPV亚型检测，且HR-HPV阳性率达90%以上。粗提法具有操作简便、耗时较短、成本较低等优势，能够获得有效的HPV结果，但对于HPV多型别感染的检测表现欠佳。
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