【摘 要】
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采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyuwedang三个地区的热泉水样、泥样以及沉积物样品中分离获得细菌菌株,通过检测蛋白酶产生透明圈和福林酚蛋白
【机 构】
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国家海洋局第一海洋研究所海洋生物活性物质重点实验室,印度尼西亚海洋与渔业研究局海洋生物技术与水产品加工研究中心
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采用MSM寡营养培养基从印度尼西亚Pantai cermin,Kalianda和Banyuwedang三个地区的热泉水样、泥样以及沉积物样品中分离获得细菌菌株,通过检测蛋白酶产生透明圈和福林酚蛋白酶活性测j定相结合的方法,从中筛选出1株产嗜热蛋白酶的菌株PBI,该菌株经初步鉴定为短杆菌属(Brevibacillus),并对其酶学性质进行了研究.结果表明,菌株PBI产蛋白酶的最适酶活温度为60℃,最适pH值为8.0～9.0,具有较好的热稳定性和pH稳定性.60℃时酶的半衰期为30 min,70℃条件下20 min仍保持46.1％的酶活,该酶在pH值为5.0～9.0范围的缓冲液中酶活相对稳定.其产嗜热蛋白酶的酶活力最高可达到60.53 U/mL,在100℃条件下仍能保留26.37％的相对酶活.Fe2+,Fe3+,Cu2+和Zn2+对嗜热蛋白酶活性具有明显的抑制作用.该嗜热蛋白酶对EDTA敏感,苯甲基磺酰氟(PMSF)、亮抑酶肽(Leupeptin)、苄眯(Benzamidine)和胃蛋白酶抑制剂(Pepstain A)对该嗜热蛋白酶都有一定的抑制作用,说明其酶活性受到丝氨酸、半胱氨酸残基的影响.结果表明,该菌株是1株具有进一步改造利用价值的产蛋白酶菌株.
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