抗肝癌单链免疫毒素HAb25（scFv）-PE40的构建及其导向作用的实验研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenda1982

【摘要】

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目的构建单链免疫毒素HAb25(scFv)-PE40并探讨其导向细胞毒作用.方法采用亚克隆技术,首先将HAb25(scFv)与绿脓杆菌外毒素基因突变子PE40,在ply5载体上构建HAb25(scFv)-PE40单

【作者】

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胡川闽郭建秀李鹏陈安刘彦仿

【机构】

：

第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室,第四军医大学病理学教研室

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2005年22期

【关键词】

：

肝细胞肝癌单链抗体免疫毒素克隆表达 hepatocellular carcinoma scFv immunotoxin cloning ex

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目的构建单链免疫毒素HAb25(scFv)-PE40并探讨其导向细胞毒作用.方法采用亚克隆技术,首先将HAb25(scFv)与绿脓杆菌外毒素基因突变子PE40,在ply5载体上构建HAb25(scFv)-PE40单链免疫毒素基因;再将其亚克隆入pBV220原核表达载体中, 转化DH5α宿主菌,温度诱导表达;SDS-PAGE观察其表达水平并建立目的蛋白的纯化方法;间接免疫荧光染色鉴定HAb25(scFv)-PE40与肝癌细胞结合的特异性;体外导向细胞毒实验明确其是否具有选择性靶细胞杀伤活性.结果限制性酶切图

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