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本研究采用优化的NTG和EMS条件进行连续诱变，结合酸变性血红蛋白平板的筛选条件，快速而高效地选育低产蛋白酶A啤酒酵母突变菌株。突变菌株啤酒发酵所分泌的蛋白酶A稳定并显著低于出发菌株，说明突变菌株经过诱变后，编码蛋白酶A的基因序列可能发生突变。导致分泌蛋白酶A活力下降。通过设计编码蛋白酶A的PEP4基因特征引物，采用PCR技术扩增其PEP4基因，并通过测序得出其基因序列，与出发酵母菌株序列和标准酵母菌株相应基金序列比对，并研究其突变位点。结果表明发生突变的氨基酸位于N端的第134位，发生突变的氨基酸为天冬