大肠癌相关基因ST13的原核表达及鉴定

来源 :浙江大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：orangeboy2222

【摘要】

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目的: 原核表达大肠癌相关基因ST13,并予以鉴定.方法:将ST13 cDNA经PCR扩增和亚克隆,与GST原核表达载体pGEX-4T-2重组,转化E.coli INVαF′菌表达,经Gluta th ione Sepharose

【作者】

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邵吉民郑树耿礼仪

【机构】

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浙江大学医学院基础医学系,浙江大学肿瘤研究所

【出处】

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浙江大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2001年6期

【关键词】

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大肠肿瘤遗传学基因表达序列分析 DNA ST13基因原核表达 Intestinal neoplasms/genet Gene expression

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目的: 原核表达大肠癌相关基因ST13,并予以鉴定.方法:将ST13 cDNA经PCR扩增和亚克隆,与GST原核表达载体pGEX-4T-2重组,转化E.coli INVαF′菌表达,经Gluta th ione Sepharose 4B亲和层析GST-ST13融合蛋白,再以凝血酶切得到ST13蛋白.结果:限制性酶切和DNA测序表明,ST13cDNA ORF正确克隆于pGEX-4T-2多克隆位点 .经IPTG诱导表达的GST-ST13融合蛋白主要存在于可溶性上清,表达量占大肠杆菌总蛋白2 0%.经亲和层析,

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