【摘 要】
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用AS.1398中性蛋白酶酶解制备坛紫菜(Porphyra haitanesis)ACE抑制肽,并经超滤膜、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,纯化产物测定其氨基酸组成,并
【机 构】
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福建省水产研究所,福建,厦门,361012福建农林大学食品科学学院,福建,福州,350002;福建省水产研究所,福建,厦门,361012;
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用AS.1398中性蛋白酶酶解制备坛紫菜(Porphyra haitanesis)ACE抑制肽,并经超滤膜、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化,纯化产物测定其氨基酸组成,并运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定分子质量.结果显示:坛紫菜酶解液经超滤分离获得分子质量小于2000D的组分ACE抑制活性最高,IC50为0.73mg/mL;该组分进行Sephadex G-15凝胶层析分离得6个组分,组分E的IC50最小,为0.67mg/mL.组分E经RP-HPLC分离得峰6对ACE的抑制率最高,达到89.54%;峰6再次过RP-HPLC,又洗出2个蛋白峰,说明峰6并不是单一物质,还需进行多次反复纯化.测定峰6的氨基酸组成主要含有Tyr、Val和Phe,同时采用MALDI-TOF-MS分析发现有8个主要的质子峰,信号最强的质子峰为m/z 861.17,有4个峰聚集在m/z 860左右,说明峰6平均分子质量大约为860D,推算出紫菜降血压肽含有3个Val、2个Phe、1个Tyr,N端为Val,可能的排序顺序有18种.
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