论文部分内容阅读
目的 探讨安罗替尼联合放射治疗对食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡及放射治疗敏感性的影响.方法 将对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞随机分为0μmol·L-1安罗替尼组、2μmol·L-1安罗替尼组、4μmol·L-1安罗替尼组、8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组、128μmol·L-1安罗替尼组,分别用含终浓度为0、2、4、8、16、32、64、128μmol·L-1安罗替尼的培养基进行培养.采用细胞计数试剂盒-8法检测8组食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并计算细胞增殖抑制率.应用Graphpad Prism8软件绘制细胞增殖抑制曲线并计算半抑制浓度(IC50),选择IC50值最小时的安罗替尼浓度及处理时间作为后续实验的药物处理条件.另收集对数生长期的食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞,随机分为0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组.0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组细胞分别用不含安罗替尼的培养液培养48 h后,更换不含安罗替尼的培养液,并分别给予0、2、4、6 Gy的X射线照射;0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组使用含终浓度4μmol·L-1安罗替尼的培养液培养48 h后,更换为不含安罗替尼的培养液,同时分别给予0、2、4、6 Gy的X射线照射.采用平板克隆形成实验检测不同X射线照射剂量的单独照射组和联合照射组细胞的克隆形成能力,并计算各组的存活率.将0 Gy单独照射组、2 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组归为单独照射组,将0 Gy联合照射组、2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组细胞归为联合照射组,采用单击多靶模型检测安罗替尼联合放射治疗对KYSE-150细胞放射治疗的敏感性.采用流式细胞术检测0 Gy单独照射组、4 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组和4 Gy联合照射组细胞凋亡情况.结果 安罗替尼干预24 h时,2μmol·L-1安罗替尼组、4μmol·L-1安罗替尼组、8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率均显著高于0μmol·L-1安罗替尼组(P<0.05),4μmol·L-1安罗替尼组、8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率随安罗替尼干预浓度的升高而升高(P<0.05);安罗替尼干预48、72 h时,0μmol·L-1安罗替尼组、2μmol·L-1安罗替尼组、4μmol·L-1安罗替尼组、8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率随安罗替尼干预浓度的升高而升高(P0.05);安罗替尼干预48 h时,4μmol·L-1安罗替尼组、8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率显著高于安罗替尼干预24 h时同药物处理浓度的安罗替尼组(P<0.05);安罗替尼干预72 h时,8μmol·L-1安罗替尼组、16μmol·L-1安罗替尼组、32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组、128μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率显著高于安罗替尼干预24 h时同药物处理浓度的安罗替尼组(P<0.05);安罗替尼干预72 h时,32μmol·L-1安罗替尼组、64μmol·L-1安罗替尼组细胞的增殖抑制率显著高于安罗替尼干预48 h后同药物处理浓度的安罗替尼组(P<0.05).安罗替尼处理24、48、72 h时食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的IC50值分别为(12.7±0.5)、(3.7±1.0)、(6.8±0.7)μmol·L-1.2 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组细胞的存活率均显著低于相同照射剂量的单独照射组(P<0.05);4 Gy单独照射组、6 Gy单独照射组细胞的存活率均显著低于2 Gy单独照射组(P<0.05);4 Gy联合照射组、6 Gy联合照射组细胞的存活率均显著低于2 Gy联合照射组(P<0.05);6 Gy单独照射组细胞的存活率显著低于4 Gy单独照射组(P<0.05);6 Gy联合照射组细胞的存活率显著低于4 Gy联合照射组(P<0.05).单独照射组和联合照射组的D0值分别为5.84、4.11 Gy,放射增敏比为1.42.4 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组、4 Gy联合照射组细胞凋亡率显著高于0 Gy单独照射组(P<0.05);4 Gy联合照射组细胞凋亡率显著高于4 Gy单独照射组、0 Gy联合照射组(P0.05).结论 安罗替尼联合放射治疗可抑制食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞的增殖能力,并增加食管鳞状细胞癌细胞对放射治疗的敏感性.