【摘 要】
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目的 绿色荧光蛋白(GFP)基因转染标记版纳微型猪骨髓间充质干细胞(pBMSC),分析GFP转染对pBMSC增殖和成脂分化的影响.方法 以不同剂量携带GFP基因慢病毒共培养的方法转染标记p
【机 构】
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650032昆明,解放军920医院细胞生物治疗中心,干细胞与免疫细胞生物医药技术国家地方联合工程实验室,云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室,云南省干细胞工程实验室
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目的 绿色荧光蛋白(GFP)基因转染标记版纳微型猪骨髓间充质干细胞(pBMSC),分析GFP转染对pBMSC增殖和成脂分化的影响.方法 以不同剂量携带GFP基因慢病毒共培养的方法转染标记pBMSC,以hUCMSC为对照,流式分析方法检测不同细胞GFP的阳性率,CCK-8法检测转染细胞的增殖活性.观察GFP标记的pBMSC成脂分化诱导后的脂滴形成,异丙醇溶解脂滴,测定各组光密度值并进行比较分析.结果 以MOI为50和100的病毒载体剂量共培养72 h,可以成功标记pBMSC,MOI为50时pBMSC的GFP阳性率明显低于hUCMSC的GFP阳性率(P＜0.01).转染GFP的pBMSC生长曲线依然呈现“S”的分布特征,总体趋势与hUCMSC相似.不同GFP阳性率的pBMSC和hUCMSC成脂分化后脂滴溶解液OD值没有显著差异(P＞0.05).结论 GFP转染可以标记近交系版纳微型猪来源的pBMSC,但不会显著影响其增殖和成脂分化.
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