油用向日葵FAD2-1基因RT-PCR体系的建立与优化

来源 :黑龙江农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youlan26
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为了建立向日葵FAD2-1基因高效特异的PCR扩增体系,以油用向日葵86-1为材料提取总RNA,并反转录合成cDNA,以cDNA第一条链为模板对FAD2-1基因全长编码序列的PCR体系进行了优化.结果表明:根据已公布的FAD2-1序列设计3对特异性引物,每对引物设计了5个退火温度,筛选出适于该基因PCR扩增的引物及其退火温度,并将PCR扩增条件中循环数缩短为30次,延伸时间缩短为7 min,此改进提高了PCR反应的效率.
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