蛇毒cystatin基因合成及其在大肠杆菌的表达

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目的研究蛇毒cystatin基因的合成并在大肠杆菌系统内表达.方法根据中华眼镜蛇毒cystatin蛋白的氨基酸序列合成cystatin基因的4个片段,通过缓慢退火PCR方法将其拼接为完整的cystatin基因,经BamHⅠ及SacⅠ双酶切后定向克隆到原核表达载体pET-42a(+)中,PCR及测序鉴定,转化宿主菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE凝胶电泳分析表达产物,GST·Mag琼脂糖树脂纯化融合蛋白,Western-blot鉴定.结果成功合成蛇毒
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