【摘 要】
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目的探讨沉默Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白β-catenin对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖与凋亡的影响.方法将干扰慢病毒液(β-catenin-RNAi)和空载体慢病毒液(β-catenin-
【机 构】
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浙江省中医院皮肤整形美容科, 杭州,310006南昌大学第一附属医院整形美容科;
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目的探讨沉默Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白β-catenin对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖与凋亡的影响.方法将干扰慢病毒液(β-catenin-RNAi)和空载体慢病毒液(β-catenin-negative)分别感染A375细胞,得到的稳定感染细胞株分别标记为A375-RNAi、A375-negative.采用Western blot法检测感染后的各组细胞中β-catenin蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果β-catenin在A375细胞中高表达,在A375-RNAi细胞中的表达水平下降约55.1％(P＜0.05),即β-catenin被干扰慢病毒液有效沉默;A375-negative细胞β-catenin蛋白表达水平与A375细胞比较无统计学差异(P＞0.05).A375-RNAi细胞与A375-negative细胞、A375细胞相比增殖活性均减弱(均P＜0.05);A375-negative细胞增殖活性与A375细胞比较无统计学差异(P＞0.05).A375-RNAi细胞与A375-negative细胞、A375细胞相比凋亡率明显增高(均P＜0.05);A375-negative细胞凋亡率与A375细胞比较无统计学差异(P＞0.05).结论慢病毒载体介导siRNA能有效沉默人黑色素细胞瘤A375细胞内β-catenin蛋白的表达.下调β-catenin表达能抑制A375细胞增殖,细胞凋亡率增高.
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