【摘 要】
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用酶一氯化苄法制备高分子量晚疫病菌总ＤＮＡ，通过Ｓａｕ３Ａ部分酶切并纯化后得到１５－２５ｋｂ的酶切片段，并以具有广寄主范围的柯斯质粒ＰＬＡ２９１７为载体，用Ｔ４ＤＮＡ连接酶连成为重组ＤＮＡ，包装到入噬菌体颗粒中，转染受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＳ１７－１。利用四
【机 构】
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中国南方马铃薯中心,中国农科院,沈阳农业大学
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用酶一氯化苄法制备高分子量晚疫病菌总ＤＮＡ，通过Ｓａｕ３Ａ部分酶切并纯化后得到１５－２５ｋｂ的酶切片段，并以具有广寄主范围的柯斯质粒ＰＬＡ２９１７为载体，用Ｔ４ＤＮＡ连接酶连成为重组ＤＮＡ，包装到入噬菌体颗粒中，转染受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＳ１７－１。利用四环素和卡那霉素抗性来筛选鉴定重组子，得到１０６５６个重组子，这些重组子群即为晚疫病菌的基因组文库。
The total DNA of Phytophthora infestans was prepared by the method of benzyl chloride-benzyl chloride. After digested with Sau3A and partially purified, a 15-25kb fragment was obtained. Using cosmid PLA2917 with broad host range as carrier, Enzymes into recombinant DNA, packaged into the phage particles transfected recipient bacteria E. coliS17-1. Using tetracycline and kanamycin resistance to screen and identify recombinants, 10656 recombinants were obtained, which are the genomes of Phytophthora infestans.
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