人抑癌基因 nm23-H_1 在逆转录病毒载体上表达的研究

来源 :暨南大学学报(自然科学与医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:signet886
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应用基因工程的方法,将抑癌基因nm23-H1的DNA片段克隆到逆转录病毒表达载体pLXSN,得到重组质粒pLXSN-nmh1。用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψCRIP中,通过G418筛选,得到抗性克隆。经PCR和Westernblot杂交检测证实:nm23-H1基因已整合到克隆细胞的染色体上,并且得到表达。获得的逆转录病毒滴度达105CFU/mL。 The DNA fragment of tumor suppressor gene nm23-H1 was cloned into the retrovirus expression vector pLXSN by using genetic engineering method to obtain the recombinant plasmid pLXSN-nmh1. The recombinant plasmids were transfected into the helper packaging cell ψCRIP by calcium phosphate precipitation and screened by G418 to obtain the resistant clones. The results of PCR and Western blot showed that the nm23-H1 gene has been integrated into the chromosome of cloned cells and expressed. The retrovirus titre reached 105 CFU / mL.
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