【摘 要】
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目的:为了获得人Leptin(瘦素或瘦蛋白)而进一步研究其生理作用、作用机制与病理意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,从人腹部皮下脂肪组织中分离脂肪细胞总RNA,
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院生化教研室,重庆医科大学基础医学院核医学教研室,重庆医科大学第二临床学院妇产科,第三军医大学检验系临床免疫教研室
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目的:为了获得人Leptin(瘦素或瘦蛋白)而进一步研究其生理作用、作用机制与病理意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,从人腹部皮下脂肪组织中分离脂肪细胞总RNA,经逆转录、PCR扩增出肥胖基因的编码序列(Ob基因cDNA),再克隆到表达载体pPICZα中,在毕赤酵母菌株GS115中表达.结果:PCR的扩增产物长度为462bp,克隆后的表达产物,经SDS-PAGE证实,约为分子量为17kD的特异蛋白条带,与人瘦素的理论预计值相符合,经放免法测定,表达量达到36mg/L.通过其多聚组氨酸
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