【摘 要】
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目的 研究慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩异常的机制.方法 将40只4周龄的C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组10只,分别为空白对照组(腹腔注射等量灭菌注射用水)、低浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.003 mg/kg·bw/d)、中浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.03 mg/kg·bw/d)和高浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.3 mg/kg·bw/d),干预24周.利用四通道微血管张力测定仪测定各组小鼠离体肺动脉对氯化钾(KCl)和TXA2类似物(9,11-dideoxy-
【机 构】
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山西医科大学公共卫生学院,山西太原030001;山西医科大学运动康复系,山西太原030001;山西医科大学基础医学院,山西太原030001;山西医科大学第一医院呼吸与危重症医学科,山西太原030001
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目的 研究慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩异常的机制.方法 将40只4周龄的C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组10只,分别为空白对照组(腹腔注射等量灭菌注射用水)、低浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.003 mg/kg·bw/d)、中浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.03 mg/kg·bw/d)和高浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.3 mg/kg·bw/d),干预24周.利用四通道微血管张力测定仪测定各组小鼠离体肺动脉对氯化钾(KCl)和TXA2类似物(9,11-dideoxy-9α,11α-methanoepoxy prostaglandin F2α,U46619)的收缩反应,及对硝普钠(Sodium Nitroprusside,SNP)和乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)的舒张反应;使用原代培养的C57BL/6J小鼠肺动脉平滑肌细胞,利用α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)进行免疫荧光鉴定;采用鼠尾胶原收缩法检测各组肺动脉平滑肌细胞对血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,AngⅡ)的收缩反应;全细胞膜片钳记录各组肺动脉平滑肌细胞Kv电流;RT-PCR和Western blot检测各组肺动脉Kv1.5的mRNA和蛋白表达量.结果 血管张力检测结果显示,与空白对照组相比较,尼古丁干预24周可浓度依赖性的增强C57BL/6J小鼠离体肺动脉对KCL和U46619的最大收缩反应,同时尼古丁可浓度依赖性的减弱C57BL/6J小鼠离体肺动脉对SNP和ACh的最大舒张反应,差异有统计学意义(P＜0.05).胶原收缩法结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉平滑肌细胞对AngⅡ的收缩呈浓度依赖性的增强,差异有统计学意义(P＜0.05).膜片钳结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉平滑肌细胞Kv电流逐渐减小,其Ⅰ-Ⅴ曲线向右并向下移动.RT-PCR和Western blot结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉Kv1.5的mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性的减小,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 慢性尼古丁干预致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩功能异常,其机制可能与抑制Kv1.5有关.
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