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目的
采用汉逊酵母系统重组表达GⅡ.4型诺如病毒(norovirus,NoV)主要结构蛋白VP1,对纯化后获得的两种不同形态类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)分别进行理化性质鉴定和免疫效果评价。
方法将表达GⅡ.4型VP1蛋白的重组工程菌高密度发酵,纯化后获得两种不同形态的VLPs;通过Western blot、SEC-HPLC、动态光散射法和透射电镜等方法检测两种VLPs的理化性质。将两种VLPs分别免疫BALB/c小鼠,比较免疫血清对两种颗粒的抗体结合性和组织血清抗原(histo-blood group antigen, HBGA)-VLPs阻断水平。
结果纯化后可获得两种不同直径的VLPs,颗粒均一度良好;动态光散射测定两种颗粒水合粒径分别为53.98 nm和45.18 nm。两种VLPs与HBGA受体结合类型和程度相似,大颗粒VLPs的免疫血清对两种颗粒的结合性和HBGA-VLPs阻断抗体水平均高于小颗粒VLPs,但差异无统计学意义(P>0.05)。
结论汉逊酵母表达NoV GⅡ.4 VP1蛋白,可形成形态不同的两种重组VLPs,两种VLPs具有相似的理化性质和免疫原性,但大粒径VLPs可能更适合作为重组人诺如病毒疫苗的抗原组分。