不同IL-8亚型的原核表达

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aklehigh
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目的构建一种精确表达小分子蛋白的技术平台,原核表达IL-8的3种不同亚型,使产物仅为研究对象本身,以避免大分子载体片段对下游研究的干扰。方法采用PCR方法扩增仅仅编码IL-8(1-77aa)I、L-8(6-77aa)和IL-8(9-77aa)成熟肽片段的基因,分别TA克隆到载体PET SUMO。测序验证后的重组质粒转化至表达菌BL21(DE3)中诱导表达,融合蛋白用基质辅助解吸电离飞行时间质谱仪进行串联质谱鉴定(MALDI-T0F-MS/MS),通过特异性的SUMO蛋白酶酶解载体SUMO蛋白,利用SUMO
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