【摘 要】
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目的 研究低氧、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对卵巢癌细胞多药耐药基因(mdr-1)及其编码P-糖蛋白(P-gp)表达的调控,探讨低氧影响卵巢癌细胞对泰素的敏感性及其机制.方法 对常氧
【机 构】
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武汉市中心医院妇产科,华中科技大学同济医学院病理学系,华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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目的 研究低氧、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对卵巢癌细胞多药耐药基因(mdr-1)及其编码P-糖蛋白(P-gp)表达的调控,探讨低氧影响卵巢癌细胞对泰素的敏感性及其机制.方法 对常氧(21%O2)和低氧(1%O2、5%O2)培养的A2780细胞,应用免疫细胞化学、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)和四氮唑蓝(MTT)法等,检测HIF-1α mRNA、蛋白以及mdr-1、P-gp的表达水平和对泰素的敏感性.利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对HIF-1α的短发夹状干扰RNA真核表达载体pSiHIF-1α,并转染A2780细胞,检测转染后HIF-1α的基因沉默效果、对mdr-1和P-gp表达的影响及其对泰素敏感性的改变.结果 低氧能显著诱导A2780细胞HIF-1αmRNA和蛋白表达水平的上调,HIF-1α mRNA的表达水平与低氧浓度无关,而HIF-1α蛋白表达呈低氧浓度依赖性;低氧能诱导A2780细胞的表达上调,且呈低氧浓度依赖性;低氧A2780细胞对泰素的敏感性较常氧明显降低(P＜0.05).pSiHIF-1α转染后,低氧A2780细胞能显著下调HIF-1α的表达,明显抑制mdr-1和P-gp的表达,其对泰素的敏感性显著增加.结论 低氧能降低A2780细胞对泰素的敏感性,其机制可能是通过HIF-1α调控mdr-1和P-gp的表达而实现的.
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