5—脂氧合酶诱导表达系统的建立

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xi00xi

【摘要】

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为建立5-脂氧合酶(5LO)诱导表达系统,深入研究5LO功能、信号转导机制及药物筛选,采用PCR扩增含HindⅢ酶切位点的2 kb长的5LO cDNA基因片段并将其克隆入质粒pBI-G中构建重组表

【作者】

：

周斌陈新生殷明

【机构】

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第二军医大学药学院药理学教研室

【出处】

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第二军医大学学报

【发表日期】

：

2003年2期

【关键词】

：

5-脂氧合酶诱导表达信号转导药物筛选 lipoxygenase inducible gene expression

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为建立5-脂氧合酶(5LO)诱导表达系统,深入研究5LO功能、信号转导机制及药物筛选,采用PCR扩增含HindⅢ酶切位点的2 kb长的5LO cDNA基因片段并将其克隆入质粒pBI-G中构建重组表达载体pBI-5LO.pBI-5LO/pTK-Hyg共转染Tet-HeLa细胞.多西环素与转染细胞孵育48 h诱导目的基因表达.对构建的重组载体pBI-5LO进行序列测定,证实克隆的目的基因片段是5LO基因片段,且阅读框架正确.X-gal染色证实多西环素能诱导目的基因表达,阳性细胞的细胞核被染为蓝色.提示5LO诱

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