【摘 要】
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目的 探讨超声破裂载基因微泡增强心肌细胞反义RNA转染与表达的效应.方法 构建受磷蛋白(phospholamban,PLB)反义RNA真核表达质粒PcDNA 4.1-asPLB,采用磷酸钙共沉淀、超声辐照及超声破裂载基因微泡等方法介导反义RNA转染.采用RT-PCR及Western blot检测心肌细胞PLB、肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic retculum Ca2+ATPase,SE
【机 构】
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100029,北京,首都医科大学附属北京安贞医院心内科,北京心肺血管病研究所,100029,北京,首都医科大学附属北京安贞医院心内科,北京心肺血管病研究所,100029,北京,首都医科大学附属北京安贞
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目的 探讨超声破裂载基因微泡增强心肌细胞反义RNA转染与表达的效应.方法 构建受磷蛋白(phospholamban,PLB)反义RNA真核表达质粒PcDNA 4.1-asPLB,采用磷酸钙共沉淀、超声辐照及超声破裂载基因微泡等方法介导反义RNA转染.采用RT-PCR及Western blot检测心肌细胞PLB、肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic retculum Ca2+ATPase,SERCA2a)mRNA和蛋白表达水平,观察不同方法介导PLB反义RNA转染对心肌细胞PLB及SERCA2a表达的影响.结果 与空载体PcDNA4.1比较,PcDNA4.1-asPLB能特异地抑制心肌细胞PLB表达(P＜0.05).超声破裂载基因微泡明显增强反义RNA转染与表达,与其他转染组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).PcDNA4.1-asPLB对SERCA2a表达无明显影响,但降低PLB/SERCA2a比值.结论 超声破裂载基因微泡是一种高效的反义RNA转染方法,其介导PcDNA4.1-asPLB转染能明显抑制心肌细胞PLB表达。
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患儿男,4岁.因口唇、肢端青紫3年余,发热7 d入院,外院曾经诊断为"先天性心脏病,法洛四联症".查体:胸骨左缘3～4肋间闻及4/6级连续性杂音,向周围传导伴震颤.超声心动图显示:①左室长轴观可见右室增大,右室壁、室间隔增厚,室间隔膜周部连续性中断约18 mm,主动脉内径增宽,骑跨于室间隔之上,骑跨率约为52%(图1),彩色及频谱多普勒示室水平双向分流;②大动脉短轴观右室流出道为盲端,仅见主动脉瓣
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目的 探讨经皮下注射超声造影剂(SonoVue)在检测乳腺癌患者前哨淋巴结(SLN)中的应用价值.方法 对常规超声检出的42例乳腺肿块患者经皮下肿块边缘3、6、9、12点各注射1.25 m1SonoVue,观察同侧腋窝SLN的造影增强情况,记录淋巴管开始增强时间、增强淋巴结个数、部位、淋巴结开始增强时间、消退时间.并与美兰染色及病理对照,比较造影对SLN检出的准确性.结果 42例乳腺肿块患者术前超
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