【摘 要】
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目的 基于Nogo-A/RhoA/ROCK信号通路探讨雷公藤甲素减轻氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的机制。方法 CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对正常SH-SY5Y细胞活性的影响以筛选最佳的药物作用浓度;然后将SH-SY5Y细胞分为4组:正常对照组,模型组,雷公藤甲素(1nmol/L)干预组,Rho激酶抑制剂法舒地尔(15μg/mL)干预组。CCK8法检测SH-SY5
【基金项目】
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山西省基础研究计划项目(20210302123478,20210302123476); 基于炎性反应的重大疾病创新药物山西省重点实验室开放课题(2021sxcxyw12); 国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室开放课题(2021-KF-04T);
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目的 基于Nogo-A/RhoA/ROCK信号通路探讨雷公藤甲素减轻氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的机制。方法 CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对正常SH-SY5Y细胞活性的影响以筛选最佳的药物作用浓度;然后将SH-SY5Y细胞分为4组:正常对照组,模型组,雷公藤甲素(1nmol/L)干预组,Rho激酶抑制剂法舒地尔(15μg/mL)干预组。CCK8法检测SH-SY5Y细胞活性;JC-1试剂盒评估线粒体膜电位;免疫荧光染色检测NogoA,ROCK2和GAP43的表达;Westernblot法检测GAP43、PSD95、NogoA,NgR,RhoA和ROCK2的表达。结果 CCK8结果显示,雷公藤甲素的最适作用浓度为1nmol/L。与正常对照组比较,模型组细胞活性降低(P<0.001);线粒体膜电位下调(P<0.001);GAP43和PSD95表达降低(P<0.001);同时NogoA、NgR、RhoA和ROCK2表达增加(P<0.001);雷公藤甲素干预和法舒地尔干预均可以改善OGD/R诱导的细胞损伤,使细胞活性增加(P<0.001),线粒体膜电位上升(P<0.001);上调GAP43和PSD95表达(P<0.05);同时下调NogoA、NgR、RhoA和ROCK2的表达(P<0.001)。结论 雷公藤甲素可能通过抑制NogoA/RhoA/ROCK信号通路减轻OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤。
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