【摘 要】
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目的 比较来源于出生5dSD乳鼠和成年SD大鼠的脂肪源性干细胞(ADSCs)在同等条件下进行培养时增殖情况的差异. 方法 分别分离乳鼠和成年大鼠皮下脂肪组织并使用Ⅰ型胶原酶消化法获取ADSCs,进行形态学观察.应用流式细胞仪检测ADSCs表面标记物CD45、CD29、CD90的表达情况,并在同等条件下接种相同数量的两种第2代ADSCs,培养4d后行细胞计数,比较ADSCs数量的差异.于96孔板上对
【机 构】
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510280广州,南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室,510280广州,南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验
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目的 比较来源于出生5dSD乳鼠和成年SD大鼠的脂肪源性干细胞(ADSCs)在同等条件下进行培养时增殖情况的差异. 方法 分别分离乳鼠和成年大鼠皮下脂肪组织并使用Ⅰ型胶原酶消化法获取ADSCs,进行形态学观察.应用流式细胞仪检测ADSCs表面标记物CD45、CD29、CD90的表达情况,并在同等条件下接种相同数量的两种第2代ADSCs,培养4d后行细胞计数,比较ADSCs数量的差异.于96孔板上对相同数量的两种第2代ADSCs进行体外培养,应用CCK-8和alamar blue试剂盒连续7d对细胞增殖情况进行观察,酶标仪检测吸光度值,并绘制增殖曲线. 结果 流式细胞仪检测到来源于乳鼠和成年大鼠的ADSCs表面标志物均显示干细胞特性:CD45表达均呈阴性,CD29表达率分别是98.04%和93.17%,CD90表达率分别是94.92%和93.3%.在接种数量、培养条件和培养时间相同情况下,细胞计数结果显示,来源于乳鼠的ADSCs增殖数量[(8.87±0.13)×105]明显高于成年大鼠[(4.51±0.36)× 105].来源于乳鼠的ADSCs的吸光度值在第6、7天(CCK-8检测)和第2~7天(alamar blue检测)均明显高于来源于成年大鼠的ADSCs,比较差异均有统计学意义(P <0.05). 结论 来源于乳鼠的ADSCs比来源于成年大鼠的ADSCs增殖能力更强。
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