基于HPLC-Q-Exactive的PRM技术检测核桃露中核桃、杏仁、花生、大豆源性成分

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应用高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱的PRM技术,检测核桃露中核桃、杏仁和主要掺杂物种大豆、花生4种源性成分.从植物组织(核桃、杏仁、大豆和花生)提取的蛋白质,经还原、烷基化、胰蛋白酶酶解后,采用HPLC-Q-Exactive的Full MS-ddMS2(TopN)模式检测,数据经Proteome Discoverer软件与Uniprot蛋白数据库对比分析,筛选出各物种的特征肽段,然后根据这些肽标志物的质荷比和出峰时间建立HPLC-Q-Exactive-PRM检测方法,并使用Skyline软件对特征肽进行定量分析.结果 表明:核桃露中核桃蛋白、杏仁蛋白、大豆蛋白和花生蛋白的最低检出限分别为10、30、20 mg/L和10 mg/L.经验证,该检测技术具有良好的专属性,比MRM技术更为准确、可靠,且有效消除了其他离子的干扰,为植物蛋白饮料物种来源鉴定提供了一种稳定、灵敏、可靠的检测技术.
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