【摘 要】
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目的：建立探讨吴茱萸的道地性的分子标记技术。方法：应用改良CTAB法提取吴茱萸基因组DNA；构建RAPD反应体系,并从引物浓度、模板浓度、酶量、dNTP量四个方面改良反应体系；对全国三个省市五个吴茱萸产区采取的样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析,构建遗传发生树。结果；建立了优化的DNA提取方法；获得改良的RAPD反应体系(25μL)为：模板45 ng,引物量15 pM,
【机 构】
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湖南中医药大学 药学院,湖南 长沙 410208 湖南中医药大学 药学院,湖南 长沙 410208
【出 处】
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中华中医药学会2009年药用植物化学与中药资源可持续发展学术研讨会
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目的：建立探讨吴茱萸的道地性的分子标记技术。方法：应用改良CTAB法提取吴茱萸基因组DNA；构建RAPD反应体系,并从引物浓度、模板浓度、酶量、dNTP量四个方面改良反应体系；对全国三个省市五个吴茱萸产区采取的样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析,构建遗传发生树。结果；建立了优化的DNA提取方法；获得改良的RAPD反应体系(25μL)为：模板45 ng,引物量15 pM,酶1.25 u,dNTP量7.5 pM；对RAPD扩增结果进行聚类分析发现在相似度系数为0.78时,铜仁、浏阳、建德、温州的吴茱萸能各自聚集在相同地域的族群,不同品种吴茱萸差异较大,浏阳地区的吴茱萸和石虎在相似度系数为0.68时聚集为两个类群。结论：研究发现吴茱萸道地性遗传背景差异明显,而RAPD技术是一种可用于吴茱萸道地性鉴别的有效手段。
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