【摘 要】
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背景 研究表明,年龄相关性黄斑病变易感因子2(ARMS2)基因A69S位点的变异与年龄相关性黄斑变性( AMD)的发病及病变的进展高度相关,但ARMS2蛋白在正常成人眼组织中的定位仍存在
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背景 研究表明,年龄相关性黄斑病变易感因子2(ARMS2)基因A69S位点的变异与年龄相关性黄斑变性( AMD)的发病及病变的进展高度相关,但ARMS2蛋白在正常成人眼组织中的定位仍存在争议,相关功能尚未完全明确.目的 研究ARMS2蛋白在正常成人视网膜和脉络膜各层的表达定位及其在视网膜色素上皮(RPE)细胞的分布,为进一步从蛋白水平研究ARMS2基因的功能提供实验基础.方法 收集死亡后立即摘除的正常供体眼球10只,来自年龄为28～42岁的男性,将其中3只眼球的视网膜和脉络膜组织制作冰冻切片,采用组织免疫荧光法在激光共焦显微镜下检测ARMS2蛋白在视网膜和脉络膜各层的分布.另7只眼球用于分离视网膜组织,并用组织块培养法进行RPE细胞的原代培养,培养的细胞用CK32抗体进行免疫荧光染色鉴定.应用荧光显微镜检测ARMS2蛋白在RPE细胞内的表达及定位情况.结果 激光共焦显微镜下可见ARMS2蛋白在正常人视网膜血管、RPE层、Bruch膜、脉络膜血管内呈强阳性表达,而在视网膜神经节细胞层、内核层、外丛状层、外核层、内丛状层ARMS2蛋白表达较弱.组织块法培养的RPE细胞呈多角形,细胞质中可见大量的棕褐色色素颗粒,CK32染色表明原代培养RPE细胞的细胞质中可见大量的绿色荧光颗粒.在RPE细胞内ARMS2阳性蛋白呈簇状红色荧光,主要分布于细胞质中,细胞核为蓝色荧光.结论成年人正常眼视网膜血管中、RPE层、Bruch膜、脉络膜血管内均有ARMS2蛋白的强表达,此外,RPE 细胞的细胞质中也可见呈簇状分布的ARMS2蛋白.
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