汉坦病毒汉城型浙37株G1、G2包膜糖蛋白基因重组体的构建及在真核细胞中的表达

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lwhxtq

【摘要】

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【作者】

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黄玉仙翁心华朱函坪瞿涤

【机构】

：

200040,上海,复旦大学附属华山医院传染科,200040,上海,复旦大学附属华山医院,医学分子病毒实验室,浙江省疾病控制中心流行性出血热实验室,

【出处】

：

中华传染病杂志

【发表日期】

：

2003年21期

【关键词】

：

汉坦病毒膜糖蛋白类真核细胞

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目的构建汉坦病毒浙37(Z37)株包膜糖蛋白基因G1、G2真核表达质粒,并在真核细胞中表达.方法根据Z37 M基因序列设计6条引物,分别以质粒pGEMZ37、pCUMZ37为模板,通过聚合酶链反应(PCR)获得G1及G2片段.将G1、G2片段经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后插入至真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切鉴定,并测序证实.以磷酸钙沉淀法分别将重组质粒转染COS-7细胞,用间接免疫荧光法(IFA)检测瞬时表达的蛋白.结果获得分别含有编码汉坦病毒(HV)Z37株包膜糖蛋白G1、G2基因的重组质粒pcDNA3.1-G1、pcDNA3.1-G2;在转染的COS-7细胞内,用IFA可检测到细胞内有特异性荧光.结论成功地构建了HV Z37株包膜糖蛋白G1、G2基因真核表达载体,并可在COS-7细胞中瞬时表达.

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