G156A六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶原核表达载体的构建和表达

来源 :贵阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chaos32167

【摘要】

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目的: 构建原核表达载体pPROEX HTb-G156A MGMT,观察突变型G156A MGMT在大肠杆菌中的表达情况.方法: 通过基因重组技术将G156A MGMT亚克隆至pPROEX HTb原核表达载体,在大肠杆

【作者】

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肖芸王季石孙等军任志娟张维吴正宇张旭方琴

【机构】

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贵阳医学院附院

【出处】

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贵阳医学院学报

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

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六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶大肠杆菌基因表达

【基金项目】

：

贵州省科技厅科研项目;

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目的: 构建原核表达载体pPROEX HTb-G156A MGMT,观察突变型G156A MGMT在大肠杆菌中的表达情况.方法: 通过基因重组技术将G156A MGMT亚克隆至pPROEX HTb原核表达载体,在大肠杆菌DH5α中经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果: 经PCR及酶切分析证实,成功构建了pPROEX HTb-G156A MGMT原核表达载体,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示重组克隆化基因pPROEX HTb-G156A MGMT在大肠杆菌DH5α中有表达.结论: G156A MGMT在大肠杆菌DH5α中有表达,为获取突变型MGMT工程蛋白奠定了基础.

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