【摘 要】
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利用PCR技术,从枯草杆菌DB403染色体上扩增出谷氨酰胺转胺酶基因,将其克隆到大肠杆菌载体pET32a(+)中,成功构建谷氨酰胺转胺酶表达载体pET32-BTGase,并转化大肠杆菌BL21(DE3)
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利用PCR技术,从枯草杆菌DB403染色体上扩增出谷氨酰胺转胺酶基因,将其克隆到大肠杆菌载体pET32a(+)中,成功构建谷氨酰胺转胺酶表达载体pET32-BTGase,并转化大肠杆菌BL21(DE3).重组克隆在IPTG诱导下,表达出硫氧还蛋白-谷氨酰胺转胺酶(Trx-BTGase)融合蛋白,表达量占细菌总蛋白量的26%.利用金属螯合层析纯化菌体裂解上清中表达的融合蛋白,纯度超过80%,再通过分子筛层析进一步纯化得到融合蛋白纯品.酶活性分析表明表达的Trx-BTGase融合蛋白具有交联蛋白的活性,并发现
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