论文部分内容阅读
目的
探讨人血清白蛋白(albumin, Alb)对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)后血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性的影响以及内皮细胞摄取Alb的途径。
方法在Transwell小室中培养小鼠脑内皮细胞(bEnd.3细胞系)建立BBB模型，在培养基中加入10 μmol/L氧合血红蛋白构建SAH体外模型，将细胞分为对照组、SAH组和Alb组(10 mg/ml)。采用跨细胞电阻(transendothelial electric resistance, TEER)检测BBB通透性，共聚焦显微镜观察荧光标记的Alb能否被bEnd.3摄取，免疫共沉淀检测Alb能否与细胞中的陷窝蛋白-1(caveolin-1, Cav-1)相互作用。根据siRNA原理，将Cav-1 siRNA转染入bEnd.3细胞抑制Cav-1表达，采用蛋白质印迹分析检测bEnd.3细胞能否摄取Alb，采用TEER检测BBB通透性。
结果与SAH组相比，Alb组TEER值显著升高(P＝0.011)。Alb可被bEnd.3细胞摄取，并且在bEnd.3细胞中与Cav-1相互作用。Cav-1 siRNA转染可显著抑制bEnd.3细胞Cav-1表达，降低细胞对Alb的摄取能力(P＝0.025)，导致Alb对BBB的保护作用显著降低(P<0.001)。
结论Alb可能在Cav-1参与下被内皮细胞摄取并改善SAH后BBB通透性。