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目的观察HIV-1辅受体的配体、趋化因子RANTES和SDF-1的双顺反子表达载体pCMV-R-K-S-K在HeLa细胞系表达,并对其抗HIV-1感染作用进行初步观察.方法应用PCR扩增RANTES-KDEL基因,鉴定后与真核表达质粒pCMV-S/K连接,构建RANTES和SDF-1双顺反子表达载体pCMV-R-K-S-K,酶切鉴定并测序.脂质体介导转染HeLa细胞,间接免疫荧光及放射免疫沉淀法检测RANTES和SDF-1表达.合胞体形成实验初步检测其抗HIV-1感染的作用.结果酶切鉴定和测序证明成功构建了pCMV-R-K-S-K双顺反子表达载体,间接免疫荧光及放射免疫沉淀法证实RANTES和SDF-1可以表达于HeLa细胞.pCMV-R-K-S-K转染能够抑制M和T嗜性HIV-1膜蛋白诱导的合胞体形成.结论双顺反子表达载体pCMV-R-K-S-K转染的HeLa细胞可以表达HIV-1辅受体的配体RANTES和SDF-1,并能抵抗HIV-1感染.