【摘 要】
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目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对卵巢癌细胞CD4+T细胞极化和免疫细胞因子的调节作用及其机制.方法:将CD4+T细胞和卵巢癌SKOV3细胞进行体外共培养.共培养的细胞分为对照组、HSYA组(2μg·ml-1的HSYA处理共培养体系处理24 h)、Toll样受体(TLR)8的拮抗剂CU-CPT9a组(共培养体系中加入5 μg·ml-1 CU-CPT9a处理24 h)、HSYA+ CU-CPT9a组(共培养体系中加入2μg·ml-1的HSYA和5 μg·ml-1CU-CPT9a处理24h)、HSYA+
【机 构】
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陕西省肿瘤医院妇瘤科,陕西西安710061
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目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对卵巢癌细胞CD4+T细胞极化和免疫细胞因子的调节作用及其机制.方法:将CD4+T细胞和卵巢癌SKOV3细胞进行体外共培养.共培养的细胞分为对照组、HSYA组(2μg·ml-1的HSYA处理共培养体系处理24 h)、Toll样受体(TLR)8的拮抗剂CU-CPT9a组(共培养体系中加入5 μg·ml-1 CU-CPT9a处理24 h)、HSYA+ CU-CPT9a组(共培养体系中加入2μg·ml-1的HSYA和5 μg·ml-1CU-CPT9a处理24h)、HSYA+ Motolimod组(共培养体系中加入2μg·ml-1的HSYA和4.5 μg·ml-1TLR8的激动剂Motolimod处理24 h).流式细胞术对体系中Th1、Th17和Th2细胞进行检测分析.使用酶联免疫吸附测定法检测IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-10的水平.蛋白质印迹法检测TLR8、p65、磷酸化的p65(p-p65)及核因子κB抑制因子α(IκBα)的水平.结果:HSYA组的Th1细胞和Th17细胞的百分比及IL-1β、TNF-α、TLR8、p65和p-p65的表达水平均低于对照组(P＜0.05),而IL-4、IL-10和IκBα的表达水平高于对照组(P＜0.05).另外,与HSYA组相比,CU-CPI9a联合HSYA明显降低Th1细胞和Th17细胞的百分比(P＜0.05),而且增加了Th2细胞的百分比(P＜0.05).另外,与HSYA组相比,HSYA+Motolimod组Th1细胞和Th17细胞百分比增加(P＜0.05),Th2细胞百分比降低(P＜0.05);IL-1β、TNF-α的表达上调(P＜0.05),但IL-4、IL-10的表达水平下调(P＜0.05).结论:HSYA通过TLR8信号调节卵巢癌CD4+T细胞极化和免疫细胞因子的表达.
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