【摘 要】
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目的利用反向遗传学技术构建来源人感染禽流感病毒H5N1和H7N9 HA和NA基因的H5N9亚型禽流感病毒。方法全基因合成A/Beijing/01/2003（H5N1）禽流感病毒HA基因片段和A/Zhejiang/DTID-ZJU10/2013（H7N9）禽流感病毒NA基因片段，插入到pHW2000载体，与携带有A/Puerto Rico/8/34（H1N1）的6个内部基因的pHW2000重组质粒一
【机 构】
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650031 昆明，中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,650031 昆明，中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所；昆明医科大学,650031 昆明，中国医学科学院/北京协和医学院
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目的利用反向遗传学技术构建来源人感染禽流感病毒H5N1和H7N9 HA和NA基因的H5N9亚型禽流感病毒。
方法全基因合成A/Beijing/01/2003（H5N1）禽流感病毒HA基因片段和A/Zhejiang/DTID-ZJU10/2013（H7N9）禽流感病毒NA基因片段，插入到pHW2000载体，与携带有A/Puerto Rico/8/34（H1N1）的6个内部基因的pHW2000重组质粒一起转染293T和MDCK混合细胞，拯救H5N9重组病毒。
结果核酸测序、HA和NA基因转录和表达检测、细胞病变分析确定利用该反向遗传学系统可以成功拯救H5N9病毒。重组H5N9病毒在MDCK细胞上复制增殖能力低于相同方法拯救H1N1病毒。
结论利用反向遗传学技术成功构建一株H5N9重组病毒。
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