利福平对兔脂肪干细胞增殖、成骨及黏附支架的影响

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目的 探讨利福平(rifampicin,RFP)对兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs)增殖、成骨及黏附支架的影响,为后期RFP缓释系统与rADSCs的复合奠定实验基础.方法 分离培养rADSCs,检测细胞周期及表面抗原CD44,成骨、成脂诱导后分别行茜素红及油红O染色.用利福平生长液干预rADSCs,按浓度分为0、10、20及30μg/ml 4组,分别绘制细胞生长曲线、检测细胞凋亡率及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量.制备同种异体脱钙骨支架,并复合各组rADSCs,计算细胞黏附率,扫描电子显微镜观察复合情况.结果 rADSCs呈长梭形生长,G0/G1期占78.3%±4.2%,表面抗原CD44阳性表达.成骨诱导后茜素红染色及成脂诱导后油红O染色均为阳性.生长曲线示30μg/ml组第4~11天增殖能力较其他3组弱(P<0.01),细胞凋亡示30 μg/ml组凋亡率高于其他3组(P<0.01),ALP检测示成骨诱导后第14天30μg/ml组ALP含量较其他3组少(P<0.01),细胞黏附率示30μg/ml组较其他3组低(P<0.01).扫描电镜观察30 μg/ml组黏附的细胞数量少,形态松散.结论 不影响rADSCs增殖、成骨及黏附支架的RFP临界浓度约为20μg/ml.
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